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375 人阅读发布时间:2015-02-09 15:44
目前肿瘤发生细胞的分离主要利用细胞表面的相对特异的抗原与相应抗体结合后通过免疫磁珠或流式细胞仪进行细胞分选,其中以流式细胞仪进行细胞分选效率最高。但除了造血干细胞的表面抗原较为特异和丰富外,其他组织缺乏明确的特异的干细胞抗原,表3-5-1提供各种肿瘤代表性癌干细胞标志物。
实体肿瘤发生细胞研究进展缓慢,目前仅仅在乳腺癌和脑肿瘤有肿瘤发生细胞的报道,食管癌发生细胞尚无相关研究。有研究表明利用核酸染料Hoechst342标记混合细胞后利用流式细胞仪进行细胞分选,可以在造血组织获得SP(sidepopulation)亚群,该亚群已经被证明为具有干细胞功能的亚群。黏附分子EP-CAM的表达与食管角化上皮细胞的增殖和分化有明显的相关,增殖能力越高,分化越低则表达越高。干细胞的黏附分子多为高表达。利用两者联合有望能分离出食管癌发生细胞。获得该亚群后可以系统检测其生物学行为特征及分子特征。


肿瘤组织中的细胞呈异质性,其中存在极少量的细胞具有自我更新及多向分化等一系列正常干细胞的生物学特征,这些细胞称为肿瘤干细胞(cancerstemcel)或肿瘤起始细胞(tumorinitiatingcel)。目前研究发现,肿瘤干细胞具有很强的致瘤性,并对放化疗不敏感,往往成为肿瘤复发与转移的重要原因之一,使肿瘤不能根治,因此,食管癌干细胞的分离和鉴定就成为食管癌靶向治疗的重要途径。
食管癌细胞无特异的标志物给食管癌干细胞的分离和鉴定带来很大困难;利用DNA荧光染料Hoechst342和流式细胞技术,筛选肿瘤起始细胞,即SP细胞(sidepopulationcel),SP细胞是目前肿瘤干细胞研究中的一个重要方法。关于食管癌SP细胞的分离鉴定主要利用黄鼎志,高全立的材料(StemcelandDevelopment,208,8.1)。我们已用该方法,分离鉴定和研究了食管癌EC9706细胞中SP细胞的一些特性,并证实其与干细胞某些生物学特性的一致。并以基因芯片研究了食管癌细胞EC9706中SP细胞与NSP细胞(non-SPcel)的基因表达谱,为食管癌干细胞生物学标志和探讨其成瘤机制提供更多的实验线索。