甲基三嗪酮检测方法(畜产品、水产品)

  1分析目标化合物

甲基三嗪酮。

甲基三嗪酮亚砜。

甲基三嗪酮砜。

2仪器、设备

液相色谱一质谱仪(LC／MS)。

液相色谱一质谱／质谱仪(LC／MS／MS)。

3试剂

除下列试剂外，使用附录1所列试剂。

乙腈：高效液相色谱专用。

水：高效液相色谱专用。

强碱性阴离子交换树脂小柱(150mg)：内径12 mm～13 mm聚乙烯柱管中填充150 mg强碱性阴离子交换树脂或具有同等分离特性的物质。

甲基三嗪酮：标明纯度。

甲基三嗪酮亚砜：标明纯度。

甲基三嗪酮砜：标明纯度。

4试验溶液的制备

4．1提取方法

4．1．1脂肪

称取5．00g试样，加入20mL乙腈饱和正己烷及10 g无水硫酸钠，均质，加人20mL乙腈．使用振荡器剧烈振荡5 min．以3 000 r／min离心分离5 min，分取乙腈及正己烷层，再使用振荡器剧烈振荡5 min，静置，分取乙腈层。离心分离的残渣中加入20 mL乙腈，再使用振荡器剧烈振荡5min，以3 000 r／min离心分离5 min，分取乙腈层，加入之前分离的正己烷层，剧烈振荡5 min，静置，分取乙腈层，与之前的乙腈层合并，用乙腈定容为50 mL。取其中10 mL，于40℃以下浓缩，除去溶剂。残渣中加入10mL 1 mol／L氨水：甲醇(1：1)混合液溶解。

4．1．2除脂肪之外的样品

称取5．00g试样，加入20mL乙腈及10 g无水硫酸钠，均质后，以3 000 r／min离心分离5min。在乙腈层中加入20 mL乙腈饱和正己烷，剧烈振荡5 min，静置，分取乙腈层。离心分离的残渣中加人20 mL乙腈，剧烈振荡5 min，以3 000 r／min离心分离5 min。分取乙腈层，加入之前分离的正己烷层，剧烈振荡5min，静置，分取乙腈层，与之前的乙腈层合并，用乙腈定容为50mL。取其中10mL，于40℃以下浓缩，除去溶剂。残渣中加入10 mL l mol／L氨水：甲醇(1；1)混合液溶解。

4．2净化方法

在强碱性阴离子交换树脂小柱(150 mg)中依次注入5 mL甲醇及5 mL水．弃去流出液。注入4．1所得溶液后，注入5 mL甲醇，弃去流出液，注入10 mL 2%(体积分数)甲酸一甲醇溶液，收集溶出液，于40℃以下除去甲酸及甲醇。残渣用1．OmL，乙腈溶解，作为试验溶液，

5标准曲线的制作

用乙腈配制浓度为lO mg／100 mL(以甲基三嗪酮计)各标准品的标准溶液，再用乙腈稀释为O．00lmg／L～O．1mg／L(以甲基三唪酮计)的溶液数点，分别注入LC，MS或LC，MS／MS进行测定，用峰高法或峰面积法绘制标准曲线。

6定量试验

取试验溶液注入LC／MS或LC／MS／MS进行测定，根据第5章的标准曲线求出各化合物(以甲基三嗪酮计)的含量。并计算其和。

7确证试验

LC／MS或LC／MS／MS确证。

8测定条件

LC／MS：

柱：十八烷基硅烷化硅胶柱，内径2，0 min～6．O mm，长100 mm～250 mm，粒径2μm～5μm。

柱温：40℃。

流动相：乙腈：0．1％甲酸混合液从(1：99)至(1：0)的浓度梯度运行35 mln，在(1：O)保持10min。

离子化方式：ESI(一)。

主离子(m／z)：甲基三嗪酮424；

甲基三嗪酮亚砜440；

甲基三嗪酮砜456。

保留时间标准：甲基三嗪酮35 min；

甲基三嗪酮亚砜30 min；

甲基三嗪酮砜33 min。

9测定低限

各化合物(以甲基三嗪酮计)为0．001 mg／kg。

10注意事项

10．1检测方法概述

本方法用乙腈从试样中提取甲基三嗪酮、甲基三嗪酮亚砜及甲基三嗪酮砜，乙腈／己烷分配后，经强碱性离子交换树脂小柱净化，LC／MS测定、确证。

10．2注意点

10．2．1 甲基三嗪酮亚砜10．38 mg及甲基三嗪酮砜10．75 mg相当于甲基三嗪酮10．0 mg。

10．2．2试验溶液制备时，部分甲基三嗪酮亚砜会氧化为甲基三嗪酮砜。

10．2．3 LC／MS测定时，内径3．0 mm柱子的标准溶液及试验溶液的标准注入量为10 μL，但是柱子及仪器不同，其注入量亦不同，必要时要对最佳注入量及流动相条件加以研究。

10．2．4 LC／MS的测定条件因仪器不同，其最佳离子化方式及离子的生成亦不同，有必要针对不同的仪器研究其最佳测定条件。

10．2．5测定值超过标准曲线上限时，试验溶液要用乙腈适当稀释后再进行定量，使其在标准曲线的范围之内。

来源：北京标准物质网www.biaowu.com