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496 人阅读发布时间:2015-12-01 17:19
在组织培养工作中,培养液内需加适量抗菌素,以抑制可能存在的细菌和霉菌的生长,但不影响细胞的生长。通常是青霉素和链霉素联合使用。在特殊情况下,选择哪一种抗菌素、剂量多少、何时加入等等,与污染源、抗菌素的抗菌范围、抗菌素的稳定性等有密切关系。
1)青霉素、链霉素(双抗)液
10mL Hank'S液或三蒸水溶解1.0x 106μg/瓶的硫酸链霉素,取8 mL硫酸链霉素液溶解8.0x105μg/瓶的青霉素粉,即成青霉素、链霉素各1.OxlO5μg/mL的母液。使用时,100 mL培养基内加母液O.1 mL,这样培养基内青霉素、链霉素最终使用浓度为各100μg/mL。
2)卡那霉素
将1瓶卡那霉素(5.0×104μ瓶),溶于5 mL Hank’s液中,即成1.OxlO4μg/mL母液。使用时每100 mL培养基内加O.5 mL母液,最终使用浓度为50μg/mL。
3)制霉菌素
制霉菌素不溶于水,故只能配制成5.Oxl04μg/mL的悬液。使用时每100 mL培养基内加O.5 mL母液,终浓度为25 μg/mL。抗菌素液、抗霉菌液配制时无菌操作、分装,一20℃保存3个月。
注意:短期使用试剂4℃保存,储存试剂-70—-20℃保存;酶、蛋白制品,应一20℃保存。
来源:中国微生物菌种网www.bnbio.com