动物益生菌菌种的筛选标准

    分离到的微生物菌种除了进行形态学、培养特性和理化鉴定外，还要按照益生菌的标准进行进一步筛选，益生菌制品的好坏首先取决于菌种的选择。选种的原则必须以微生态学原理为指导，根据来源于自然，回归于自然的原则，选出与宿主、原生境、原微生态系、原微群落甚至原微种群相适应的菌种。其他标准还应包括必须是非致病性的、具有可生产性、抵抗胃酸和胆汁酸、可黏附于上皮细胞、能够产生抗微生物的物质及调节免疫的能力、具有影响代谢活力的能力(同化胆固醇，产牛乳糖酶及维生素等)。同时在对益生菌的功效进行研究时也要采用科学的实验设计和分组方法，如采用双盲法和对照组等。通过系统完善的方法和手段，才能保证益生菌制品的开发达到目的。

    益生菌是益生菌制品质量的直接保证，各国对益生菌菌种(菌株)都有明确规定，如1989年美国食品药物管理局(FDA)和美国饲料管理协会(AAFCO)公布了42种“可直接饲喂且通常认为是安全的微生物”，联合国粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)发布了《关于食用益生菌选用评价规则》，指出食用益生菌的菌株必须通过表型和基因型的鉴定，并通过体外和动物试验证实其具有明确地功能和良好的安全性，还要通过一期临床试验。

    1989年美国FDA要求作为益生菌菌种应具有以下特性：产生有机酸，如乳酸、乙酸、甲酸等，这些酸能够抑制病原微生物，也可以作为动物的能量或对其他微生物有益，还可以促进肠道蠕动、加快废物和腐败菌等的排泄；产生抗菌物质，如细菌素、过氧化氢或其他化合物抑制病原菌；有益菌黏附占位，竞争排除，防止病原菌定植；刺激免疫反应，增加免疫系统活力；产生各种消化酶，如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和糖苷酶，提高饲料利用率，此外双歧杆菌还产生DNA聚合酶可修复损伤的细胞；减少毒胺的排放，中和内毒素。

    对于现行广泛应用的益生菌菌株可通过自然机制进行基因转移和重组改良菌种，使其具有更好的品质，在生产中发挥更大的作用。作为益生菌的菌种，还应具备以下几个基本条件。

    1．安全性好

    在自然界，人和动物内部存在大量微生物，这些微生物有些对动物是致病的，有些则可使人类致病。即使同一种细菌，如蜡状芽孢杆菌，有的引起人类食物中毒，有的引起动物红细胞溶解，有的对人和动物无任何不良反应。以上说明，对分离的菌种必须进行严格的急性、亚急性毒性试验和致畸试验，证明确实无毒、无致畸、无致病、无耐药性、无药残等不良反应后方可进行其他试验。

    2．存活能力强

    这要求微生态制剂中的活菌在生产过程中经干燥、压片、混入配合饲料制成颗粒料后仍能存活一定数量的活菌体；对酸、碱、胆汁有耐受性，耐高温，可避免防腐剂、抗氧化剂和饲料加工过程以及动物肠道内胃酸、胆汁的影响；保存相当长时间后，进入动物体内能发挥最佳效应。因此，筛选的菌种应能长期保存，避免防霉剂、抗氧化剂和加工制片、制粒及胃酸等对菌种存活率造成不良影响。一般要求在每克饲料中存活菌数应多于3×10⁸CFU。

    3．能产生多种有益活性物质

    进入动物肠道内的益生菌在其生长繁殖过程中，除产生淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶等以帮助动物消化吸收和利用相应的营养物质外，还能产生维生素、氨基酸、促生长因子代谢产物等。

    4．对抗菌药物敏感性强

    筛选的菌种对常用的多种抗生素等具有很好的敏感性，可以证明菌体内无耐药性质粒。若菌体内存在耐药性质粒，将不可避免地在人和动物肠道内的细菌之间进行传递，这比使用抗生素带来的危害更大。

    5．能在肠道内定植

    一般认为，微生物在肠道上皮的黏附和在肠道内定居具有一定相关性。某些微生物在肠道内能生长但不能定居，不能定居的微生物很容易随着消化道内容物和胃肠蠕动而被排泄出体外。在肠道内能生存并定居的微生物，还必须能耐受种种不利环境的影响，包括胃酸、胆盐、肠道蠕动、消化酶、免疫反应、内源微生物及其产生的抗菌物质等。因此作为益生菌必须具备足以抵制肠道内诸多不利于细菌生长的因素影响的能力。

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