无菌工艺验证相关的重要因素

    一、环境设施的消毒

    无菌生产区内的清洁，消毒剂都应当是无菌的，清毒剂喷洒瓶在每次灌装消毒剂前，应事先经过灭菌处理；定期更换消毒剂；当检测到芽胞类微生物时，立即用杀芽胞剂对环境设施表面进行喷洒消毒；所用消毒剂的杀菌效果应经过评价。

    二、设备的清洗和灭菌

    在无菌生产工艺中有些设备需要人工清洗，如除菌过滤器、灌装头、软管、有时还包括贮罐。在对清洗好的设备进行装配时，要留意将0型圈和垫圈等装配适当，以免发生污染或药液泄漏。

    设备在灭菌釜腔室内灭菌时，其包装和放置方式应利于冷空气排出，特别要注意贮罐和过滤器内的各个部位都被充分灭菌。因此，宜采用真空脉动程序对设备和过滤器灭菌，并且灭菌程序须经过验证。

    三、过滤器的验证和完好性检查

    通常由过滤器生产商进行过滤器的验证试验，但是，药品生产企业需保存其验证资料：如果药品溶液与验证用试剂的差别较大，药厂须向过滤器生产商提供药品溶液，以验证该药液与过滤器同的适应性。

    分别在灭菌前和过滤结束后检查过滤器的完好性，只有两次完好性检查均合格，药品方可进行灌装。

    四、容器及其密封件的灭菌

    无菌针剂产品的玻璃容器在使用前须进行清洗和去热原处理，去热原工艺须经过验证(塑料包装容器是在高温下即时生产出来的，一般不需考虑去热原问题)；胶塞和铝盖的灭菌工艺须经过验证。胶塞间或铝盖间存在的许多间隙导致冷空气很难被彻底排除，因此，胶塞或铝盖的灭菌包装不宜太大，而且包装间的排列不可紧密。须按照工艺验证时的状态要求，对容器及其密封件进行去热原和灭菌处理。

    五、包装容器的密封完好性检查

    应对无菌工艺产品的包装容器及密封件的完好性进行检查。检查时，一般将在生产线上灌装有培养基的产品容器口(密封处)浸于高浓度的菌悬液(挑战菌株应具有运动性、菌液浓度不低于106CFU/ml )中维持一段时间(通常为4小时)，然后将容器口洗擦干后，置于适当温度(常为30～35％)下培养14天，检查容器内培养基是否被污染，如果没有污染品，则完整性检查合格。例如，同药品的稳定性考察，完整性检查应涵盖产品的整个有效期。

    六、气体过滤器的完好性检查

    有些药品的生产工艺需使用氮气和(或)压缩空气，生产结束后，务必检查这些气体过滤器的完好性，如果过滤器的完好性检查不合格，则要对相关产品采取相应的处置。

    七、成品的无菌检查

    无菌检查结果可反映无菌生产工艺的可靠性。特别要注意比较无菌工艺产品的无菌检查阳性率与最终灭菌产品的无菌检查阳性率间的差异，如果前者多于后者，则表明无菌生产工艺存在偏差，建议进行培养基灌装试验以考察无菌工艺的可靠性。

来源：北纳细胞网 www.bncc.org.cn