细胞生物学的实验技术体系

     细胞生物学的发展对实验技术的发展有很大的依赖性。细胞生物学以其丰硕的研究成果当之无愧地成为生命科学的核心基础学科和前沿学科，同时也形成了一套丰富的、有广泛应用价值的实验技术体系。细胞生物学实验技术体系可以大致归纳成以下几个方面。

     (一)细胞离体培养技术

     细胞生物的几乎所有组织细胞都可作为细胞离体培养的材料。针对不同的细胞培养对象，已形成了丰富多样的培养方法，积累了丰富的经验。细胞离体培养技术在生命科学基础理论研究和应用科学研究中是应用极广泛的基础技术，在分子生物学研究和细胞工程及基因工程高科技领域也是不可或缺的技术基础。

     (二)细胞形态结构观察技术

     细胞显微结构观察，主要体现于各种光学显微镜技术，包括复式显微镜、倒置显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜等。细胞超微结构观察主要依靠X射线衍射仪和电子显微镜技术。观察方式分为活体细胞观察、细胞固定染色观察和组织切片同定染色观察。记录观察结果可采用静态显微摄影和动态显微拍摄电影术。

     (三)细胞亚显微结构和化学组分分离分析测定技术

     细胞中的某些细胞器、亚细胞组分和生物大分子的分离主要靠高速离心和差速离心技术．配合相应的提取纯化方法。一些生物大分子组分，如 DNA、RNA、蛋白质、酶类、脂类、糖类．可依据研究需要．选用细胞分化染色技术、免疫组织化学技术、分子标记及放射自显影技术、分光光度技术、流式细胞术等。上述技术是研究细胞的结构与功能的关系，或判定评价细胞的功能状态的重要手段。

     (四)细胞各种生命现象的研究技术

     生物体的一切生命现象都是其物质构成的基本单元——细胞的生命活动体现。研究细胞生命活动的规律，对揭示生物体整体生命现象的物质本质和规律具有重要意义。这方面已积累了丰富的研究方法和技术。如细胞增殖和细胞周期研究技术、细胞凋亡研究技术、细胞遗传研究技术、细胞免疫研究技术、细胞信号传导研究技术、细胞代谢研究技术和肿瘤细胞研究技术等。

     (五)细胞工程技术

     所谓细胞工程即按研究者的意愿，运用细胞生物学和分子生物学技术改造细胞的结构和性状，使之满足科学研究和生产实践的需要。如人工诱变培育突变细胞株技术；经细胞杂交．筛选杂种细胞株技术；经细胞拆合、细胞核质杂交，获得克隆动物技术；DNA转染获得基因重组细胞株技术：转基因动物技术等。

     (六)细胞分子生物学技术

     细胞生物学研究的深入，必然进入生物大分子水平。对基因及其产物蛋白质的功能验证．最终要到细胞中去寻找答案。细胞生物学和分子生物学的研究目标任务及方法技术自然趋于融合。

     这个技术领域包括：

     ①细胞基因组DNA提取、纯化、定量分析技术；目的基因鉴定．即探针与DNA分子杂交技术；目的基因的克隆扩增及表达技术；基因芯片技术；目的基因结构分析技术，包括PCR、RFLP、SSCP、AFLP和DNA测序等技术；基因敲除技术等。

     ②细胞总RNA提取、纯化、定量分析技术；目的 RNA的鉴定，即探针与RNA分子杂交，分别有斑点印迹杂交、Northem blotting印迹杂交和 RT一PCR技术，可定量分析目的 RNA的表达量。

     ③细胞总蛋白质提取、纯化、定量分析技术；目的蛋白质的鉴定，即蛋白质分子杂交，分别有免疫组织化学技术和 Western boltting杂交技术，可定量分析目的蛋白质的表达水平；目的蛋白质的结构分析技术．有氨基酸序列测定和蛋白质结构的生物化学分析方法。

     来源：中国微生物菌种网 www.bnbio.com