微生物酶与细胞共固定化

   利用交联剂将微生物细胞与一种或几种其他来源的酶结合起来，形成一种结合型的固定化催化剂。这种共固定化技术可以充分利用细胞和酶各自的特点，并能把不同来源的酶和整个细胞的生物催化性质结合起来，充分发挥细胞内、外两种不同性质酶联合催化性质，而且方法简单，成本低，固定化颗粒小，比活性高，热稳定性好，氧利用效果好，产物转化效率高。
 

   用碳化二亚胺作交联剂，把酶共价结合到海藻酸钠上，然后加入微生物细胞混合均匀后，滴加到氯化钙溶液中，形成直径为２～３ｍｍ含有细胞和酶的共固定化颗粒。也可将脱水后的微生物悬浮在要结合的酶溶液中，使酶沉淀在重新水化的细胞壁上，然后脱水，再加入戊二醛和单宁，使酶与细胞交联在一起，形成共固定化。
 

   将微生物细胞体用去离子水离心洗涤２次，然后再用异丙醇在５℃下处理，以增强透性，而后在３０℃下真空干燥，得５ｇ干细胞体，然后用边搅拌边悬浮的方法使其悬浮于５０ｍｌ含有０.４ｇ的卵清蛋白和２０ｍｌ酶浓缩液 （酶活为２６００ＢＵ）中，接着再添加８０ｍｌ异丙醇和８ｍｌ戊二醛 （２５％Ｗ／Ｗ）混合物，并在２５℃下振荡培养２小时，离心或过滤收集细胞体，再用去离子水于５℃下洗涤２次，再悬浮于０.１Ｍ柠檬酸 ０.２Ｍ磷酸缓冲液中，就可获得酶———细胞结合型固定化生物催化剂。