仪器和设备的无菌操作要求

  在组织细胞培养区使用的所有仪器设备均需定期清洁，以避免灰尘沉积和防止微生物在偶然的溅出物上生长。替换物，如气罐，在进入组织培养区之前，必须进行清洁处理。正在进 行无菌操作时，不要挪动仪器设备。

(1)培养箱

湿式培养箱很容易发生污染，应定期(根据空气污染情况和使用频率决定l周1次或1 月1次)移去内容物，包括所有的架子、托盘等都要作彻底清洁，并用无毒去污剂，如Decon或 Roccall彻底清洗培养箱底部、架子和隔板，然后，用。75％乙醇洗去去污剂残迹。待乙醇完全挥 发后，再把隔板和培养物放回去。此外，可以把杀真菌剂，如2％的Roccall或l％的硫酸铜放 在培养箱底部的湿盘里，以阻止真菌生长，但这些杀真菌剂仅限于它们能作用到的表面，并不 能真正代替定期的清洗。

(2)盒装培养物

当湿式培养箱中发生了污染问题时，可以将培养皿、培养板和松盖的培养瓶放在塑料三 明治盒里进行培养。使用前，要将盒子的里外进行擦拭消毒，并在无菌空气中干燥。当从培 养箱中取出盒子时，在打开或带人工作区前，要用75％乙醇擦拭，然后，小心取出培养皿，并擦 拭盒子内部以备再次使用。

(3)充入CO₂气体

通常把培养瓶松开盖子放入湿式CO₂培养箱中以达到气体平衡，但是，这增加了被感染 的风险。往洁净的培养瓶内注入无菌的、混合好的气体，然后，把它密封起来，这样就避免了 培养瓶对通气培养箱的需要。而且可使气体均匀一致，快速平衡。现在，很多制造商 (如Coming、Falcon、Nunc、Costar)提供带渗透盖的培养瓶。可以在CO₂环境中迅速达到平 衡，而不会有污染的危险。

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