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1137 人阅读发布时间:2016-02-15 15:47
将细胞裂解后分离微管,并在4℃下处理使微管去组装,将冷处理的样品进行离心,除去不溶性物质,然后将含有微管蛋白二聚体的上清液于370C温育,使微管重新组装。经多次组装和去组装分离纯化的微管蛋白制品中仍含有少量的其他蛋白质,这些蛋白质是与微管蛋白特异性结合的,称为微管结合蛋白(microtubule-associated proteins,MAPs)。根据MAPs在电泳时所显示的条带不同,依次命名为MAP1、MAP2、MAP3、MAP4、tau蛋白,此外,还有鞭毛或纤毛中的动力蛋白等。微管结合蛋白具有一个或数个与微管结合的结构域(microtubule binding domain),具有稳定微管的作用。其余的结构域突出于微管表面形成交联桥,与相邻的微管、中间纤维或细胞膜结合,对微管网络的分布和功能进行调节。铡如在MAP2和tau蛋白的C端具有3~4个由18个氨基酸残基构成的微管结合结构域。当其与微管结合后,其N端突出于微管表面或折叠后与微管结合,并在相邻的微管之间形成交联桥,MAP2和tau蛋白与微管的结合方式决定着树突和轴突内微管束相邻微管间的距离(图6-25)。
微管结合蛋白的功能有:①稳定微管;②构成微管间的连接,使微管成束状排列;③使微管与其他结构相连接;④产生动力,如鞭毛和纤毛中的动力蛋白。
来源:中国微生物菌种网 www.bnbio.com