抗生素标准品效价复核

    如必需，应按药典抗生素微生物检定法中的三剂量法要求对工作标准品进行效价复核实验。每次实验均应称取两份国家标准品和两份需测工作标准品进行平行试验，每组实验应不少于9个平皿，实验结果的可信限率均应不得大于5％，结果取平均值。该实验需反复多次地在不同操作人员间进行，以积累充分多的数据满足统计需要。最后，将所得结果进行统计中的合并计算(不是求平均值)，才能得出被测工作标准品较为客观的效价。实验室自行标定的工作标准品只能在本室内使用。

    本试验应由具有一定实验操作经验的人员来进行。试验时应先根据所要分析的抗生素类型，来确定采用管碟法还是采用比浊分析法。本文以管碟法为例，介绍工作标准品的复核和评价方法。

    按药典要求，用标准贮备液稀释制备3个不同浓度的标准液，如80％、100％和125％。这3个浓度的对数值间是等距离的，因此在检测结果的统计学计算中可用一常数表示。国家标准品的浓度分别用 S₁、S₂和 S₃ 表示低、中、高三个浓度。工作标准品的浓度分别用 U₁、U₂ 和 U₃，表示低、中、高三个浓度。

    本法采用随机编码方式，在一平皿内的琼脂培养基表面摆放六个不锈钢小管，向每个管内加入不同浓度的溶液(图2一1)。每个工作标准品的称量样品要求做12只平皿。在规定条件下培养，培养时间结束后，目检每个平皿，看是否有抑菌区不正常或不含抑菌区的平皿，并剔除不正常的平皿。从目测结果良好的平皿中随机选取其中的九只，用适当的仪器准确量出每个抑菌圈的直径。
 

    表2一1列举了一例管碟法的统计学分析方法，包含了一组国家标准品与一组工作标准品进行对比试验的所有原始数据。将最高值减去最低值使得出每一列的数值范围。最大范围与所有范围的总和的比率应不超过0.273(针对9个平皿的分析试验并且ρ=0.05)。倘若超过了该值，则要检查列中最大范围的异常反应。

    如果某平皿的抑菌圈直径测量值异常，应该根据第十八章中第五节所讲述的方法进行计算以后再判断该平皿是否保留或剔除。只有至少6个平皿的所有数据均完整无缺时，方可进行计算。将表中的所有数据分别进行横向和纵向相加。按如下方法计算效价的对数值：

    α 为一常数，取决于各剂量的比率(表2—2)。例如，如果浓度为80％、100％和125％，比率为1:1.25，相应地，该常数值为0.12921。对大多数抗生素而言，不管是采用管碟法，还是比浊法，进行复核试验时，笔者建议采用1:1.25这一比率。

    效价的百分比(P)计算：P=100×antiLogM

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