组织培养的技术基础

     组织培养实验室的设计原则是要求工作环境清洁无尘，空气干燥清新，防止微生物污染和有害化学物质的影响。组织培养工作的基本内容包括：组织培养用器皿的洗刷和无菌处理；组织培养液的配制和储存；组织培养无菌操作和温育；培养物的观察、鉴定、分析；培养物的储存；培养实验用品的储存等。

     一、组织培养实验室设计

     根据房舍条件的不同，组织培养实验室的设计可采用不同的方案。如有多个房间，对上述组织培养工作内容可分室分区进行。

     1．无菌操作区，又称为无菌操作室，无菌操作室的大小依条件和需要而定，一般由准备间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间大小适度，便于消毒，至少要能容纳两个人同时操作．主要安置超净工作台。缓冲间能保护无菌间的无菌环境同时可设有恒温培养箱，小型离心机和显微镜等。使一些简单操作不必携出室外即可完成。准备间在最外侧，放置更衣架、盛消毒水的净手桶、组织培养无菌操作用的必备物品和灭菌处理后器皿的储存等。无菌操作室应设在无阳光直射位置，结构以铝合金为上，木质结构亦可，天花板不宜超过2．5m，确保紫外灯的消毒作用。无菌操作室的上半部用玻璃隔断，墙壁要光滑无死角，以防沉积灰尘和便于擦拭消毒。有条件的应安装空气净化和湿度调节装置。

     2．清洗和灭菌操作区，主要进行培养器皿的洗刷、浸酸、消毒、蒸馏水制备等。如有条件．这个工作区应设独立房间与其他区分开，避免潮湿和酸液蒸气的有害影响。

     3．实验材料储存区，主要为放置温箱、冰箱、电热干燥箱、物品储存柜、液氮容器等区域．要求环境清洁无尘，空气湿度不能太大。

     4．观察和研究操作区，为进行实验试剂的配制，培养细胞的观察，摄影记录，细胞性状的研究等。这个区域还应设置放射核素室和暗室等。

     如仅有一两个较大房间，可在一个大房间内划分不同功能区或用铝合金隔板隔开的办法进行分区(图2一5)。

     来源：中国微生物菌种网 www.bnbio.com