抗生素液和胶原液的配制方法

     一、 抗生素液

     培养液内加入适量的抗生素，以预防由于操作不慎而产生的微生物污染。常用的抗生素有青霉素、链霉素、卡那霉素和庆大霉素等。常用 1× 浓度的盐溶液配制成 100x 或 200x 的储备液，分装成小瓶，冰冻保存。使用前根据培养液的量加入到培养液内，每小瓶最好一次用完。

     其中最常用的为青霉素和链霉素。培养液中用量为：青霉素 100U／ml培养液，链霉素100μg／ml 培养液。

     二、胶原液

     胶原是细胞生长良好的基质，它是从动物特定组织中用人工法提取出的，利于组织和细胞的固定，亦属天然培养基。胶原主要用于细胞的附着，能改善细胞表面性质，促细胞生长。胶原可来自大鼠尾腱、豚鼠真皮、牛真皮、牛眼水晶体等，其中以鼠尾胶原最为常用且制备简便．可配制成 0．1％～1％ 的醋酸溶液，制法如下。

     (1)取组织：取体重 250g 左右大白鼠一只，从尾根部切断鼠尾，置 75％ 乙醇溶液中浸泡30min；无菌条件下将鼠尾切成 1．5cm 小段，剔除皮毛，抽出尾腱置平皿中。

     (2)溶解：取 1．5g 剪碎尾腱浸入 150ml 醋酸溶液(0．01～0．25mol／L)，置 4℃ 冰箱中，并不时摇动，48h 后，移入灭菌离心管中。

     (3)分离：以 4000r／min离心 30min ，吸取上清液，10 磅 10min 高压灭菌后分装入小瓶中．-20℃冰箱保存。

     (4)使用方法：用吸管吸少许胶原涂于灭菌培养瓶内壁的培养面上以倾斜瓶时不流动为准．切勿太厚。

     (5)向培养瓶内通以氨气后封上瓶盖：或用浸有氨水的棉球堵塞瓶口(或不用氨气处理．而是置 37℃ 温箱过夜；或置室温 48h ，再用无菌蒸馏水冲洗晾干亦可)，作用 30min ，待胶累凝固．然后用无菌生理盐水冲洗、晾干，即可使用。

     来源：中国微生物菌种网 www.bnbio.com