球红假单胞菌的培养及生物学特征(二)

    3. 球红假单胞菌生长繁殖效应

    配制新的液体培养基200mL，灭菌后用接种环接种经活化后的球红菌，进行黑暗下好氧恒温培养，温度为28℃，3小时进行计数一次。6个小时左右，细菌数就增大1倍。24小时的培养，细菌浓度大约可达到1．0×10¹²个／L，而后细菌的浓度基本不再增长。球红假单胞菌的生长繁殖如表4—2所示，由表4—2绘制出其生长繁殖曲线，如图4—1所示。

    由图可见，其生长迟缓期较短，对数生长期短，菌体数增加较快，稳定期与衰亡期较长。很长一段时间，培养基中活细胞数都较多，正好符合煤炭转化试验周期较长的特点，能很好的应用于煤炭降解试验。

    4. 球红假单胞菌菌落特征及菌体形态学研究

    （1）球红假单胞茵在固体培养基上茵落形态特征的观察

    球红假单胞菌生长迅速，用接种环在固体培养皿上划线接种，培养一天后，在接种菌种稀疏的地方，可见单个菌落；培养两天后，各菌落连成一片。从图4—2可以看出，球红菌菌落的特征是有凸起，光滑。有氧培养一天后，菌落转变成淡红色。

    （2）球红假单胞茵的染色与观察

    通过对球红假单胞菌的染色(包括革兰氏染色与鞭毛染色及球红菌来染色)试验，直接在显微镜下，放大倍数为1000倍(目镜10×物镜100)，滴加香柏油观察，可观察到球红菌个体呈球形，大部分喜黏结在一起，呈大球形或呈长杆状；黏结在一起运动较慢，单个个体运动剧烈．运动无一定方向。球红假单胞菌的显微图片如图4—3所示。通过鞭毛染色及运动特性观察，球红菌体有鞭毛且为极生鞭毛，菌体呈浅褐色而菌体周围鞭毛呈深褐色。正是由于鞭毛的存在，使得其运动没有一定的方向性。革兰氏染色显示球红假单胞菌阴性。球红菌的革兰氏染色与鞭毛染色如图4—4和图4—5所示。

根据我们的试验得出球红假单胞菌的部分生物学特性，如表4—3所示。

    四、小结

    (1)考察了球红假单胞菌的生物学特性，生长温度为28℃左右，在黑暗好氧条件下生长良好。

    (2)通过对其生长增值效应的测定，在黑暗好氧条件下，一到两天的时间，球红假单胞菌能达到对数生长期顶峰，在本试验的条件下稳定期能达到10天以上。

    (3)通过革兰氏染色试验．观察球红假单胞菌显阴性，属革兰氏阴性菌；通过鞭毛染色试验。发现球红假单胞菌周生有鞭毛；通过未染色境检，观察到球红假单胞菌大部分呈球状。且运动剧烈及不规则。

    来源：中国微生物菌种网 www.bnbio.com