呼吸酶类试验

  1．氧化酶试验
 

  (1)原理：氧化酶也称细胞色素氧化酶，是细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶。具有氧化酶的细菌首先氧化细胞色素C，然后氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化，生成有颜色的醌类化合物。使用盐酸二甲基对苯二胺时，产物呈紫红色；使用盐酸四甲基对苯二胺时，产物呈蓝色。
 

  (2)试剂：1％盐酸二甲基对苯二胺或1％盐酸四甲基对苯二胺。
 

  (3)应用：主要用于肠杆菌科和非发酵菌的鉴定，前者多为阴性，弧菌科、非发酵菌多为阳性。此外奈瑟菌属、莫拉菌属也呈阳性。
 

  2．过氧化氢酶(触酶)试验
 

  (1)原理：有些细菌具有过氧化氢酶，可把过氧化氢分解成水和新生态氧，进而形成分子氧出现气泡。
 

  (2)试剂：3％过氧化氢溶液。
 

  (3)应用：主要用于革兰阳性球菌的初步鉴定。葡萄球菌属和微球菌属触酶试验阳性，链球菌属触酶试验阴性。金氏杆菌属细菌的触酶试验也阴性。
 

  3．硝酸盐还原试验
 

  (1)原理：硝酸盐还原试验包括两个过程：一是在合成代谢过程中，硝酸盐还原为亚硝酸盐和氨，再由氨转化为氨基酸和细胞内其他含氮化合物；其次是在分解代谢过程中，硝酸盐或亚硝酸盐代替氧作为呼吸酶系统中的终末受氢体。硝酸盐还原的过程因细菌不同而异，大肠埃希菌等仅使硝酸盐还原为亚硝酸盐；假单胞菌等能使硝酸盐或亚硝酸盐还原为氮；有的细菌则可使其还原为亚硝酸盐和离子态的铵。硝酸盐还原试验系测定还原过程中所产生的亚硝酸。
 

  (2)培养基：硝酸盐培养基。
 

  (3)应用：本试验常用于细菌的鉴定。肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐，铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌等可产生氢气。厌氧菌如韦荣球菌等也能还原硝酸盐为亚硝酸盐。

资料来源：中国微生物菌种网：www.bnbio.com