细胞传代方法

根据细胞生长的特点，细胞传代方法可分为三种。

1.悬浮生长细胞传代 悬浮细胞离心(1000rpm)去上清，沉淀的细胞加入新鲜培养液后混匀再转至新的培养器皿培养。

2.直接传代法 悬浮细胞沉淀在瓶壁时，将上清培养液去除1／2～2／3，然后用吸管直接吹打形成细胞悬液后再加入新鲜培养液。

3.贴壁生长细胞传代 采用酶消化法传代，常用的是0．25％的胰蛋白酶液。主要步骤如下：弃除培养瓶中的培养液，加入0. 25％的胰蛋白酶液(以消化液能覆盖整个瓶底为准)，静置2～10分钟，显微镜下动态监测细胞消化情况。加入等体积的培养液中和胰蛋白酶液的消化作用，吸取瓶内细胞悬液，1000rpm离心5分钟。使用适量培养液重悬细胞沉淀，吸取适当比例的细胞接种于新的培养器皿内放入培养箱中培养。 

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