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428 人阅读发布时间:2016-08-25 09:32
原标题:球红假单胞菌原生质体的微波诱变及其煤炭降解转化实验研究
1. 原生质体的微波诱变选育
取酶解40min的原生质体,用渗稳剂稀释至106个/mL,而后将装有5mL菌悬液的无菌试管置于小烧杯中,杯内加水浸没试管中的菌液,然后将小烧杯放在微波器(2450MHz,650w)中进行微波处理,通过每10s换一次水的低温热分散法来抵消热效应,处理时间梯度为:10s,30s,60s,90s,120s。将处理过的原生质体适当稀释,涂布平板,计算致死率。
2. 实验结果与分析
(1)微波辐射对球红假单胞菌原生质体致死效应的影响
球红假单胞菌的原生质体经过微波辐射处理,致死率明显。辐射处理时间为30s时,原生质体的致死率就达85.2%;辐射处理时间为90s时,原生质体的致死率达到96.8%;辐射处理时间为120s时,原生质体死亡率达到100%。球红假单胞菌的原生质体致死率和辐射时间关系如图5—5所示。
从图5—5可知,球红假单胞菌的原生质体对微波辐射十分敏感,致死效应非常明显,这也是细菌原生质体更适合进行诱变育种的原因。
(2)微波辐射诱变球红假单胞菌(原生质体)的煤炭生物降解转化结果
微波辐射诱变球红假单胞菌(原生质体)的煤炭生物降解转化结果如图5—6所示。
微波辐射诱变球红假单胞菌(原生质体)的煤炭生物降解转化结果是:原生质体辐射处理时间为l0s时,球红假单胞菌对义马褐煤的降解转化率达到最大,为38.68%;原生质体辐射处理时间为30s时,球红假单胞菌对硝酸处理褐煤的降解转化率达到最大,为80.65%;原生质体辐射处理时间为l0s时,球红假单胞菌对淮南潘二煤矿次烟煤的降解转化率达到最大,为18.33%;原生质体辐射处理时间为10s时,球红假单胞菌对山西白煤的降解转化率达到最大,为38.56%。