黄孢原毛平革菌原生质体的紫外诱变

　　【来源/作者】北纳创联 

　　原标题：黄孢原毛平革菌原生质体的紫外诱变及其煤炭降解转化实验研究

　　1. 原生质体的紫外诱变选育

　　取酶解120min的原生质体．用渗稳剂稀释至lO⁶个／mL，取5mL菌液放在直径为9cm的无菌培养皿中，将培养皿置旋转圆盘(33r／min)上，并使其距离紫外灯30cm处，处理时间梯度为：20s，40s，60s，90s，120s，150s。紫外照射后，暗修复2h，以免引起细菌的光修复。将处理过的原生质体适当稀释，涂布平板，黑暗避光培养，计算致死率。

　　2. 煤炭微生物降解转化率的测试方法

　　煤炭生物降解转化率的测试方法按煤炭微生物降解转化率的测定方法中方法一执行。

　　3. 试验结果与分析

　　（1）紫外辐射对黄孢原毛平革菌原生质体致死效应的影响

　　黄孢原毛平革菌的原生质体经过紫外辐射处理，致死率明显。辐射处理时间为20s时，原生质体致死率就达80．4％；辐射处理时间为l20s时，原生质体的致死率达到100％。黄孢原毛平革菌的原生质体致死率和辐射时间关系如图5—8所示。

　　

　　从图5—8可知，紫外辐射黄孢原毛平革菌原生质体在前20s时，其原生质体的致死率的增长梯度迅速．其后随着辐射时间的延长，原生质体的致死率增长梯度缓慢，处理时间为90s、120s时，黄孢原毛平革菌的原生质体的死亡率分别为95．6％和100％。这表明黄孢原毛平革菌原生质体对紫外辐射十分敏感，致死效应非常明显。

　　黄孢原毛平革菌的原生质体紫外辐射诱变育种并不像黄孢原毛平革菌的紫外诱变育种一样，使菌株的生长时间缩短接近1／3，菌球数量增加接近1倍，菌球直径减小接近1倍；菌株的生长时间有适当缩短，不是十分明显；菌球数量的增加和菌球直径的减小亦同样不是十分明显，菌球的颜色束出现变化。

　　（2）紫外辐射诱变黄孢原毛平革菌(原生质体)的煤炭降解转化结果

　　紫外诱变黄孢原毛平革菌(原生质体)的煤炭生物降解转化结果如图5—9所示。

　　

　　紫外辐射诱变黄孢原毛平革菌(原生质体)的煤炭生物降解转化结果是：原生质体辐射处理时间为90s时，黄孢原毛平草菌对义马褐煤的降解转化率达到最大，为42．6％；原生质体辐射处理时间为90s时，黄孢原毛平革菌对硝酸处理褐煤的降解转化率达到最大，为60．16％；原生质体辐射处理时间为90s时，黄孢原毛平革菌对淮南潘二煤矿次烟煤的降解转化率达到最大，为60．2％；原生质体辐射处理时间为60s时，黄孢原毛平革菌对山西白煤的降解转化率达到最大，为40．55％。