显微荧光光谱原位测红树植物根表面微区中的蒽（二）

　　【来源/作者】北纳创联 

　　1. 结果与讨论

　　1.1 吸附于 K. obovata 和 A. marina 表面微区中蒽的同步荧光光谱

　　研究表明,红树根表面会产生强烈的自发荧光和散射光,会影响微区中蒽的荧光信号测定(如图 2a)。 同步荧光法可在一定程度上降低背景荧光和散射光信号的干扰。 每隔 5 nm,考察△λ =35 ~70 nm波长范围内对吸附于 K. obovata 根表面微区中蒽的最大荧光强度的影响(图2b)，当△λ= 60 nm,所测荧光信号的信噪比可提高至 5. 5。 在△λ=60 nm 条件下,扫描吸附于 K. obovata 根表面微区中蒽的同步荧光光谱(图3),蒽的最大峰值位于383 nm。 因 A. marina 结果与之类似(最大峰值位于 382 nm),故未列出。

　　文献表明,吸附于植物根表面 PAHs 主要分布于在根表皮细胞间隙中。 图 4 为 K. obovata表面微区中的蒽吸附量为 21. 04 pg/ μm ²时的 MFSA显微图像,微区中目标物的亮度明显增加。 如图 4b所示,吸附于根表面微区中的蒽部分以聚集态形式分布于根表皮(如黄色箭头所示)。

　　1.2 工作曲线、线性范围和检出限

　　为实现原位定量测定吸附于 K. obovata 和A. marina根表面微区中的蒽,配制系列浓度的蒽-丙酮溶液,按照实验部分2.3 节所述方法,分别测定根表面微区中不同浓度蒽的相对荧光强度(图 3)。 随着根表微区中蒽浓度的增加,其荧光强度呈线性增加(R²=0.9660);A.marina的结果与其类似;相关数据见表 2。 这表明本方法在一定浓度范围具备定量分析性能。

　　1.3回收率实验和精密度实验

　　为验证 MFSA 法原位测定 K. obovata 和 A. marina 根表面微区中蒽的分析特性,采用实验部分2. 2 节所述方法作加标回收率实验。 由表 3 可知,K. obovata 和 A. marina根表微区蒽测定方法的准确度可满足实验要求。

　　采用实验部分2. 3 节所述的实验方法测定吸附于K. obovata 和 A. marina 根表面微区中36. 8 pg/ μm ² 蒽,测定 9 个不同微区,每个微区分别测定 3 次。 由表 4 可知,方法的重复性和精密度满足实验要求。

　　2. 结 论

　　上述结果表明,所建 MFSA 系统具备原位获取红树根表面微区目标物荧光光谱和荧光图像信息的能力。 为在实验室模拟生态条件下原位探讨植物根部微区中 PAHs 的环境行为提供了新方法。 然而,较采用 LITRF 法原位测定红树植物根系表面(非微区)单组分 PAHs 和两组分混合PAHs 的检出限相比,本方法仍有很大的提升空间。 文献中所分别采用自行设计的多用途荧光比色皿和固体样品架,为进一步提升本方法的分析性能提供了研发思路。

 

 

　　来源：北京标准物质网