《食品微生物检测方法确认技术规范》（五）

(1)确认试验数据的处理和初步审核

微生物学检测数据通常不是正态分布的，为了获得更加对称的分布，应将计数结果转化成对数形式。首先将实验结果数据绘成图．垂直y轴代表待确认方法结果(应变量)，水平x轴代表基准方法结果(自变量)，自变量x可认为是精确的已知量。方法确认时应仔细审查和评估协同试验数据，然后对有效的数据进行统计分析。无效数据可能由以下原因导致：没有遵循方法进行实验；实验结果数据作图出现非线性标准曲线；没有给出适当的系统操作说明；分辨率不适当；吸收曲线变形；发生意外原因或其他非典型情况出现。

很难对带有微小偏差和离群值的平均数、标准偏差等进行可靠评估。检查数据以确定任一协作实验室的数据是否连续偏高，或连续偏低，或者偶然的结果，这些数据与其他大多数预期数据有较大差异。参见GB／T 6379．2进行离群检验剔除离群值，再进行方差分析。

(2)定量方法的性能指标

测定限(1imit 0f determlnatlorl)：指在给定的置信水平上，样品中的目标微生物能被可靠检出的最低浓度或含量。

线性(1inearity)：线性是指当使用给定矩阵得到结果的方法性能，所得到的结果与测试样品中被分析物数量成比例，被分析物增加时呈线性或结果成比例增加。

包容性(Inclusivity)和排他性(exclusivity)：包容性指使用待确认方法从众多菌中检测到目标菌的能力。排他性指待确认方法对可能引起交叉反应的相关非目标菌株的抗干扰能力。包容性和排他性的数据可以用来证实某个方法能够与目标菌的主要血清型发生反应，而与其他相关的属和／或种不发生反应。

重复性S_r(repeatabIlity)和重复性值r(repeatability value)：重复性是指实验室内精密度，用S_r表示，指在相同的条件下(如：设备、操作者、实验室或培养时间)对同一个样品使用相同的方法分析获得的一系列的独立测试结果之间的一致程度。重复性值是一个数值．在重复性条件下，两个独立测试结果之间的绝对差值不超过此数值的概率为95％。

再现性S_R(reproduc|bIlity)和再现性值R(reproducIb_1ity value)：再现性是指实验室间精密度，用SR表示，指在不同实验室由不同人员使用不同设备(相同性能)和同一方法对同一样品进行分析所获得的独立测试结果之间的一致程度。再现性值是一个数值，在再现性条件下，独立测试结果之间的绝对差值不超过此数值的概率为95％。

相对标准偏差RSD(relative sta。ndard deviation)：在定量研究时，相对标准偏差是一个有用的衡量精密度的工具。RSD等于s，和s一除以平均值，目的是用于比较不同平均值之间的变异程度。微生物检验实验室方法协同确认的结果可以使用再现性相对标准偏差(RSD)和重复性相对标准偏差(RSD)来综合描述。

(3)定量方法确认试验结果的计算

确定待确认方法与基准方法的平均值应采用一致的统计方法。对食品类型和接种水平采用方差分析或成对T检验。定量方法的重复性与再现性具体按GB／T 6379．2中的方法进行计算。

(4)定量方法确认试验结果的判定

待确认方法的线性、包容性和排他性指标应符合本节“2．方法的确认程序”中性能指标(2)的要求，同时实验室内确认和实验室间协同试验中涉及的每一食品类型的所有接种水平，待确认方法与基准方法的平均值经方差分析或配对T检验在5％水平没有统计学显著差异，表示方法在适用性范围内，待确认方法和基准方法定量检验结果在5％水平没有统计学显著差异，待确认方法的性能指标符合方法学要求。

当线性、包容性和排他性指标有一项不符合本节“2．方法的确认程序”中性能指标(2)的要求，实验室内确认和实验室间协同试验中涉及的某些或某一食品类型的某些或某一接种水平，待确认方法与基准方法的平均值经方差分析或T检验在5％水平具有统计学显著差异，需对待确认方法进行修订，重新进行方法确认，或者将该类食品从适用性声明中去除。

待确认方法的线性、包容性和排他性指标不符合本节“2．方法的确认程序”中性能指标(2)的要求，或者实验室内确认和实验室间协同试验中涉及的所有食品类型的所有接种水平，待确认方法与基准方法的平均值经方差分析或T检验在5％水平具有统计学显著差异。表示待确认方法的性能指标不符合方法学要求。