撞击法测定室内空气中的菌落总数

一、原理

撞击法是采用撞击式空气微生物采样器采样，通过抽气动力作用·使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流，使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上，经37℃，48h培养后，计算出每立方米空气中所含细菌菌落数的采样测定方法。

二、仪器

(1)高压蒸气灭菌器；

(2)恒温培养箱；

(3)冰箱；

(4)平皿(直径5cm)；

(5)制备培养基用一般设备：量筒，三角烧瓶，pH计或精密pH试纸等；

(6)撞击式空气微生物采样器。

采样器的基本要求：对空气中细菌捕获率达95％；操作简单·携带方便稳定，便于消毒。

三、培养基

(一)成分

蛋白胨，lOg；牛肉浸膏，3g；氯化钠，5g；琼脂，15～20g；蒸馏水，1000mL。

(二)制法

将上述各成分混合，加热溶解，校正pH至7．4，过滤分装，121℃20min高压灭菌．用自然沉降法时倾注约15mL于灭菌平皿内，制成营养琼脂平板。

四、操作步骤

(1)选择有代表性的房间和位置设置采样点。将采样器消毒．按仪器使用说明进行采样。一般情况下采样量为30~1 50L，应根据仪器性能和室内空气微生物污染程度，酌情增加或减少空气采样量。

(2)样品采完后，将带菌营养琼脂平板置36±1℃恒温箱中，培养48h茵落数，并根据采样器的流量和采样时间，换算成每立方米空气中的菌落数。以cfu／m³报告结果。

计算公式如下：

c=N／Q_st×1000

式中：c一空气菌落总数，cfu／m³；

N——平皿菌落数，cfu；

Q_s一标准状况下采样流量，L／min；

t一采样时间，min。

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