生成曲线测定法

  其线性部分称为对数生长期。加药后药物对细胞生长的影响可通过生长曲线反映出来。本试验可获得三方面的数据：

1．药物对细胞的杀伤率将对照组及加药组生长曲线的线性部分延伸至Y轴，可分别得到截距N₀及N₀’。它们代表接种后具有增殖力的细胞数。药物对增殖细胞的杀伤率一[(N₀一N₀’)／N₀]×100％。

2．药物对倍增时间(TD)的影响 以t代表培养时间，N₀及N_t分别代表接种后及培养t小时后的细胞数，按细胞倍增时间计算公式来计算倍增时间。如果倍增时间延长表明药物使细胞增殖能力减弱。细胞倍增时间(TD)按下式计算：

3．药物对细胞生长饱和密度(Ns)的影响 取处在生长稳定期的培养细胞，计数单位面积或体积的细胞均数，即细胞生长饱和密度。此数值减小也表示细胞增殖活性减弱。

(一)集落形成试验法

肿瘤系由不同比例的增殖及分化能力不同的瘤细胞群构成。其中仅小部分具有自我更新能力．即所谓的干细胞，约为整个细胞群的l％。干细胞为放射治疗及抗癌药物治疗的靶细胞，它与肿瘤的治愈、复发或转移关系密切。一般认为只有干细胞才具有分化、形成集落的能力。故集落法可作为体外检测抗癌药物敏感性方法之一。

根据公式计算集落抑制率，即：

在半对数纸上以集落抑制百分率与剂量对数作图，可以得到一条S形曲线并求出药物的IC₅₀值。或者，求出集落存活分数(S)，即：

以集落存活分数的对数与剂量作图，可以得到细胞存活曲线。由于药物对细胞的杀伤作用一般遵循一级动力学，即一定量的药物杀伤死一定百分比的细胞，故存活曲线呈带肩区的斜率向下的直线。其方程为S=1-(1-e^-D/Do)ⁿ。S为存活分数，D为剂量，Do是存活分数在细胞存活曲线中直线部分下降63％所需的剂量，n是曲线指数部分外延至Y轴的截距·称外推值。D0越小．敏感性越高。n反映细胞对药物引起损伤的修复能力，n越大，表不杀死细胞所需的阈剂量越大。

集落法与临床之阳性符合率约60％～70％，阴性符合率为90％～95％。

本法尚存在许多问题：①难获真正单细胞悬液；②集落形成效率低；③确定集落有一定难度；④耗时长，且重复性差。

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