兽药残留检测方法标准－提取方法

1. 标准的内容

1.1 样品的制备及保存

   样品制备，又称为样品预处理，主要包括样品切碎、匀质、混匀、离心、过滤、抑制降解等过程。

   为防止样品中可能残留的药物发生降解，一般应将采集或制备的样品立即进行－20℃ 以下冷冻储存，保证样品不变质、不损坏。

1.2 样品的前处理

   兽药残留分析的主要特点是样品基质复杂、待测药物含量低、需要繁琐的样品前处理过程。

   样品前处理的主要目的是将待测药物从样品基质中分离出来，将样品中的干扰杂质去除掉，并将待测药物转换为可检测的形式，达到仪器可检测的浓度范围。

   样品前处理过程主要包括提取、净化和浓缩三大步骤。根据待测药物的存在状态，提取前有时需对样品进行酶水解等处理。为满足仪器检测，有时需对样品进行衍生化等处理。

   (1)提取方法

   提取是用物理的或化学的手段将待测药物从样品中释放出来并转换成易于分析的状态。

   提取溶剂的选择应遵循“相似相溶”的原理。大多数兽药属于极性化合物，至少结构中含有极性基团，因此一般在极性的有机溶剂中有较高的溶解度。例如，磺胺类、喹诺酮类、β-内酰胺类、大环内酯类、林可胺类等药物可以直接使用乙腈、甲醇等水溶性极性溶剂进行提取。对于一些脂溶性的药物或其液态样品的分析，可采用乙酸乙酯、二氯甲烷等非水溶性的极性溶剂进行提取。例如，β－受体激动剂、雌激素类、苯二氮卓类等药物先在酸性缓冲体系中酶解后调至碱性，再用乙酸乙酯萃取，苯并咪唑类药物直接加入碳酸钠碱性溶液后再用乙酸乙酯提取。

   1)组织捣碎法

   组织捣碎法又称匀浆提取法。将样品(固体样品预切碎或绞碎)和 3～5倍样品体积的提取溶剂加入捣碎杯中，高速搅拌或匀浆，通过溶剂与样品充分混合，使待测药物从固体样品中快速溶出，将样品过滤或离心后移取提取液，残渣重复提取 1～2次，合并提取液进行净化。

   2)振荡法

   振荡法是较常用的提取方法。将样品(固体样品用匀浆物)和适量的提取溶剂加入具塞离心管内，中速振荡一定时间，将样品过滤或离心后移取提取液，残渣重复提取 1～2次，合并提取液进行净化。该法操作简单，可同时对多个样品进行提取，已成为目前兽药残留检测主要的提取方法。

   3)索氏提取法

   索氏提取法需使用索氏提取器。提取时需考虑待测药物的热稳定性，保证 在长时间的回流过程中不分解。该法不需要转移样品，提取效率高，是一种彻底的提取方法，但提取时间较长，耗用较多的溶剂，需对提取液进行浓缩。动物组织样品可用无水硫酸钠等一起研磨制成千粉后再进行提取。

   4)超声波提取法

   超声波提取法需借助超声波。将匀质样品置于离心管内，加入溶剂，浸于超声波水浴中进行超声，使固一液接触更加紧密、混合更加充分，增加待测药物的脱附和溶解。提高了提取效率。超声过程中产生的缓慢加热也有助于提取。

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