微生物自动化分析仪(一)

     近年来微生物检测已随着科学技术的发展而向自动化发展，其中在我国较常见的有法国梅里埃公司的 VITEK (AMS系统) 全自动微生物分析仪。这类仪器因能自动进行细菌的鉴定和药敏试验而广泛用于大医院的微生物实验室，使患者得到及时有效的治疗。现在医药工业微生物实验室也逐步配备了全自动或半自动的微生物分析仪，为快速分析、鉴定生产环境、工艺过程中的污染菌提供了现代化的基础。本节综合几年来的使用实践，对认识仪器的局限性、手工操作的重要性及如何利用自动化仪器进行未知菌的鉴定等方面介绍如下：

     一、VITEK全自动微生物分析系统工作原理

     (一)细菌鉴定原理根据不同细菌的生化性质不同，采用光电比色法，测定细菌分解底物导致pH改变丽产生不同的颜色，仪器通过电脑处理，识别被检细菌的生化反应结果并将其转化为数字组成的编码，再从编码库中查出这编码所代表的菌种名称。

     每张鉴定卡片上有30项生化反应，由计算机控制的读数器每隔l小时对各反应孔底物进行光扫描，并读数1次，动态观察反应变化。一旦鉴定卡内的终点指示孔达到临界值，指示此卡已完成。系统最后一次读数后，将所得的生物编码与菌种资料库标准菌的生物模型相比较，得到相似的系统鉴定值，自动打印出实验报告。

     (二)药敏实验原理根据每一种药物生长斜率与MIC(最小抑茵浓度)的线形关系，选择适当数目的稀释度，加入待检细菌的菌悬液，经4~15小时孵育后，应用光电比浊原理，即可得到待检菌在各浓度的斜率，与阳性对照孔斜率相比，并计算出待检菌的复合斜率，经过回归分析得到MIC值，并根据NCCLS标准获得相应敏感(S)中度敏感(I)和耐药(R)的结果。

     二、仪器构造

     见图17—2，VlTEK全自动微生物分析系统由以下几个部分组成：

     (一)菌液接种和封闭装置

     由上下两部分组成，上部为一热切割器，下部为真空仓。试管中的菌悬液用弯塑料管与测试卡进样口相连，放人真空仓内，仓内的负压使菌液充入测试卡内。采用热压切割方法将充完菌液的试卡切断并封闭。

     (二)计数器，孵箱

     孵箱由计算机控制，带有一光电比色读数头，读数器采用665nm波长的光扫描器。孵育箱内的直立圆柱转盘每隔90。置一卡片架位，共可放4个卡片架，依架子的数目可将VITE系统分为VITEK 30、VITEK 60 和 VITEK 120和 VITEK32。

     (三)工作站

     VITEK系统是采用IBM公司所生产的RISC6000工作站来进行数据收集分析及储存40000个以上测试的统计及实验数据，有多种媒体(磁盘、磁带和光盘)拷贝数据，采用图示软件、鼠标操作。计算机软件包括数据处理软件、专家系统软件和药品管理软件等。具有28种流行病学和统计报告，包括菌发生率、抗生素敏感率统计、抗生素累计敏感性、抗生素累计MIC报告、每月细菌发生率、每月细菌敏感率、工作量、生物模式统计，以及根据不同测试卡种类统计的敏感率等报告。每一种报告有41种可变参数，根据不同目的，改变某一参数时即可产生不同的流行病学报告。

     (四)测试卡

     共有11种测试卡，包括革兰阴性菌、革兰阳性菌、真菌、厌氧菌、嗜血杆菌、奈瑟菌、肠道致病菌、芽胞杆菌、非发酵革兰阴性菌、快速革兰阴性菌鉴定卡和细菌计数卡。各种不同抗生素组合的药敏测试卡共26种。

     三、操作程序

     (一)制备菌液:按不同测试卡的要求，配置不同浓度纯的菌悬液。

     (二)菌液接种与封口。

     (三)将测试卡放人孵箱／读数器内。

     (四)输入受检者资料。

     (五)计数器自动培养、判定，自动打印实验室报告。

     来源：中国微生物菌种网 www.bnbio.com