木瓜上监测试验条件的评估

　　【来源/作者】北纳创联 

　　原标题：木瓜上监测试验条件的评估：对取样的有效性和样品处理程序进行评估

　　该监测试验是在美国用一种叫做“acar”的农药活性物质进行的。

　　美国对热带水果的良好农业操作规范总结存下面表格里。

　　

　　任务

　　考虑取样样品的基本要求和应用程序的分析确认。

　　木瓜试验报告摘录

　　1．试验站点的信息

　　每一个田间试验均包括一个空白对照区和一个处理区，处理区大小在86～125m²(924～1344ft²)范围内。采用传统方法来种植目标作物，并施用农药和化肥以使小区种植的目标作物达到商品质量标准。试验站点的条件和使用模式的资料分别总结在表1和表2中。附件1给出了关于试验站点的其他附加信息。

　　2．样品处理和准备

　　在每个试验中，最后一次施药后1d从每个处理小区内采取半熟至成熟的木瓜样品(平行样品在收获间隔期内被采摘)。每个木瓜样品用四分法来缩分，每个样品的重量至少为1．8kg(4磅)，并且确保是具有代表性的不偏样品．样品在采摘后6h之内被冷冻保存。所有样品通过联邦快递或航空快递在冷冻条件下运到分析实验室，进行提取和分析。

　　样品在运送至分析实验室后要被贴上各自的编号并于一30．4～一15．8℃冷冻储存，一直到样品处理。样品需要被打碎成小块，并在食品加工机上与干冰混合均匀，然后在冷冻条件下储存直到样品提取分析阶段。

　　3．分析方法

　　运用“同时测定acar及其代谢物在木瓜上的残留”中所使用的方法来同时分析木瓜样品中acar及其代谢物的残留。为了提高方法的性能，我们对其稍加调整和修改。

　　简单来讲，该方法主要是用100mL提取溶剂从均质的木瓜中提取acar及其代谢物的残留，样品经提取溶剂提取两次，并将两次的提取液混匀。然后将提取液过滤到一个250mL的真空烧瓶里，接着将滤液转移到一个250mL的容量瓶里，最后用乙腈定容到250mL。取50mL样品用正己烷萃取两次。用二氯甲烷和2％硫酸钠水溶液对乙腈相进行处理，分层后，取其中的二氯甲烷相旋蒸近干，并用样品稀释溶剂进行稀释。经过至少2h的培育期，用具有氧化电量电化学检测的反相高效液相色谱对样品中的acar进行分析。样品中加入抗坏血酸来确保acar代谢物的残留在氧化模式下被转换成acar的残留。

　　在该研究中，对每个分析物的方法验证的最低水平是O．01mg／kg。依据方法验证最低水平的样品添加回收率计算出acar的检出限和定量限分别为O．12mg／蝇和O．37mg／kg，而．acar的代谢物的检出限和定量限分别为O．001 2mg／kg和O．003 7mg/kg。

　　处理的样品在提取后1d内进行分析。待分析的样品一般包括校准用标准品、未添加的空白、添加回收、溶剂空白和处理的样品。标准品溶液在一20～一8℃条件下储存。附录4包含了0ECD的良好实验室规范的分析证书中的分析参考标准。

　　样品要在采样后8～11d内进行分析。

　　acar及其代谢物在木瓜上的回收率总结如下表：

　　

　　

　　

　　结果与讨论

　　三个木瓜试验在代表北美自由贸易协定13号生长区的佛罗里达和夏威夷进行。对木瓜而言，试验数量和地理的代表性是充足的。木瓜被种植在砾质壤土、粉砂质黏土极其多石的淤泥中。所有试验都是在正常条件下进行的，没有出现极端或异常的环境状况。

　　该试验是为了收集有关acar(Acarmite50WP中的活性成分)的残留数据。施药方式为叶面喷施，施药量为226．8g／hm²(O．5磅／hm²)(有效成分)，施药两次，施药间隔期是21～22d，同时记录时间以便于最后一次施药后1d采集样品。每个处理小区总计大概施药453．6g／hm²(1．O磅／hm²)(有效成分)。

　　分别于空白样品中添加acar及其代谢物进行添加回收试验，并与田间处理的样品同时进行分析。不再做方法验证，因为分析工具提供了一个经济合作与发展组织的良好实验室规范所依从的方法验证研究的报告。该方法发现每个空白样品中的残留均低于方法验证最低水平，如果空白样品中的残留量大于方法验证水平的一半(即大于0．005mg／kg)，那么回收率要进行纠正。添加水平在O．01～2．Omg／kg范围内，在方法验证最低水平添加acar的空白样品的回收率在93．06％～118．2％范围内，平均回收率为107±10％(n=6)；acar的所有添加回收的平均回收率为10²±11％(n=9)。对于acar的代谢物而言，在方法验证最低水平的空白样品添加的回收率在111．2％～119．2％范围内，平均回收率为1150%±3％(n=6)；Acar的代谢物的所有添加回收的平均回收率为100%±18％(n=11)。

　　经过统计计算得出acai‘的检出限和定量限分别为O．12mg／kg和O．37mg／kg，acar代谢物的检出限和定量限分别为O．001 2mg／k和O．0037mg／kg(见附录5)。在分析方法总结报告(附录2)的附录4里展示的色谱图显示没有干扰。每次运行一个分析组就产生两个6点标准曲线，其相关系数总是≥O．993。

　　如表C．2所示，在该研究中，田间样品的最大储藏间隔期是10d。该试验不要求储藏稳定性。

　　来源：北京标准物质网www.biaowu.com