紫外可见分光光度计的FDA仪器认证方法探讨

　　【来源/作者】北纳创联 

　　摘要 介绍紫外可见分光光度计符合 FDA 仪器性能认证的方法。主要对灯能量、 吸光度的准确度和仪器线性等检定规程中没有或者确认方法不同的项目进行性能确认。分别在 235， 257， 313， 350 nm 处， 对重铬酸钾标准溶液进行测定， 若吸收系数分别在123.0～126.0， 142.8～146.2， 47.0～50.3， 105.5～108.5 范围内， 则仪器符合 FAD 认证要求；对系列重铬酸钾标准溶液进行测定， 若吸光度与浓度的相关系数 r 2 ≥ 0.999， 则仪器符合 FAD 认证要求。该认证方法可以保证紫外可见分光光度计性能正常， 使测量结果准确、 可靠。

　　Discussion of FDA Instruments Authentication Methods of Ultraviolet Visible Spectrophotometer

　　Abstract The method of the performance verification of the ultraviolet visible spectrophotometer in accordance with the FDA was introduced. The light energy， accuracy of absorbance and linearity were mainly certificated. At 235， 257， 313，350 nm， the standard potassium dichromate solution was determined respectively. If the absorption coefficient were in the range of 123.0–126.0， 142.8–146.2， 47.0–50.3, 105.5–108.5, respectively, the instrument conformed to the FDA authentication requirements. Potassium dichromate standard solution was determined， if the linear correlation coefficient of absorbance and the concentrations r 2 ≥ 0.999， the instrument conformed to the requirements. The verification method can ensure the performance of the ultraviolet visible spectrophotometer at normal level， and obtain the accurate and reliable results.

　　Keywords ultraviolet visible spectrophotometer; absorption; linearity; absorption coefficient

　　随着我国药品出口的发展， 越来越多的药品生产企业分析仪器需要通过美国食品药品监督管理局 (FDA) 的仪器认证。紫外可见分光光度计是药品生产企业重要的分析仪器， 其性能是否正常直接影响分析结果的准确性。 依据JJG 178–2007 《紫外、 可见、 近红外分光光度计》检定规程及相关检测方法［1–6］， 参考 FDA 的要求， 笔者总结出仪器的性能确认方法， 对可能影响到仪器计量性能的参数进行确认。以北京普析通用仪器有限责任公司生产的TU–1810 型紫外可见分光光度计为例［7］， 介绍按照 FDA 要求编写的仪器性能确认方法。在本次仪器性能确认中， 波长准确度和重复性、 透射比准确度和重复性、 噪声和漂移、 基线平直度、 杂散光几项性能指标的确认方法与紫外可见分光光度计检定规程［8］ 中所要求的相同， 不再详细介绍。以下主要对检定规程中没有规定或者确认方法不同的项目进行介绍。

　　1灯能量

　　检定规程中没有规定灯能量的检定方法， 而在仪器认证中 FDA 要求对此项进行确认。

　　确认方法： 仪器开机后， 通过仪器自检程序［9］，观察仪器自检时灯能量是否合格， 同时查看灯能量数值。 氘灯使用寿命可达2 000 h， 钨灯可达3 000 h，在灯使用时间内， 若仪器灯能量自检通过， 灯能量数值有效， 即可认定仪器灯能量符合 FAD 认证要求，可以评定仪器性能正常。

　　2吸光度准确度

　　在药物分析中， 需要根据药品的吸光度测量值计算药品的测量结果， 由此可见吸光度的准确度对仪器测量结果影响较大。吸光度的准确度用吸收系数进行评价［10］。在不同波长处测定重铬酸钾标准溶液的吸光度， 然后根据朗伯比耳定律计算标准吸收系数， 以吸收系数评价仪器的性能。

　　评价步骤： 称取于 120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约 60 mg， 精密称量后置于 1 000 mL 容量瓶中。检定规程 JJG 178–2007 中要求用 0.001 mol／L 的高氯酸溶液稀释基准重铬酸钾， 但高氯酸不稳定， 容易分解为次氯酸， 因此笔者采用 0.005 mol／L 的硫酸对称量的基准重铬酸钾溶解并稀释至 1 000 mL。以 0.005 mol／L 的硫酸溶液为空白在仪器工作条件 ( 仪器预热时间充分， 光谱带宽为 2 nm， 积分时间为 1.00 s， 光度测量方式为吸光度 ) 下， 用 1 cm石英比色皿， 分别在 235， 257， 313， 350 nm 波长处测定配制好的重铬酸钾标准溶液的吸光度， 根据式

　　(1) 计算吸收系数。

　　

　　式中： ε——吸收系数；

　　A——吸光度；

　　l——吸收光程， 1 cm ；

　　c——溶液的质量浓度， g／(100 mL)。

　　吸收系数测定结果及技术指标见表 1。

　　

　　在 235， 257， 313， 350 nm 波长处， 若吸收系数均在表 1 中技术指标要求范围内， 可以认定仪器性能正常， 符合 FAD 认证要求。

　　3仪器线性

　　仪器线性对测量结果影响较大， FDA 要求对仪器线性进行确认。评价方法： 在不同波长下， 对系列重铬酸钾标准溶液进行测定， 以溶液浓度对吸光度的相关性评定仪器的线性［9］。

　　评价步骤： 在上述 2 中仪器工作条件下， 以0.005 mol／L 的硫酸溶液为空白， 分别在 235， 257，313， 350 nm 波长处， 对系列重铬酸钾标准溶液进行测定， 以溶液浓度对吸光度测量值进行线性回归，计算线性相关系数。吸光度测定结果及线性技术指标见表 2。

　　

　　在 4 个波长处， 若系列重铬酸钾标准溶液质量浓度与吸光度的线性相关系数 r ² ≥ 0.999， 则仪器符FAD 认证要求， 性能正常。

　　4结语

　　虽然紫外可见分光光度计检定规程中的检定项目比较全面， 但仍不能满足 FDA 对仪器性能确认的要求。通过补充仪器确认方法， 可准确全面地评价紫外可见分光光度计的性能， 该方法符合 FDA 要求。利用该确认方法笔者已连续几年为用户完成了符合 FDA 要求的仪器确认工作， 顺利通过 FDA 对紫外可见分光光度计的仪器认证。

　　来源：《化学分析计量》

　　作者：贺宁1 ， 郭毅 1 ， 南璟 2 ， 吉雪梅 1

　　(1. 陕西省计量科学研究院， 西安 710065 ； 2. 西北国家计量测试中心， 西安 710065)



　　来源：北京标准物质网 www.biaowu.com

　　来源：中国微生物菌种网 www.bnbio.com